为什么冻结后恢复停止？

作者：365bet日博亚洲 时间：2019-10-04 02:20 浏览次数：

为什么冻结后恢复停止？
细胞冻结后恢复挂起。肖秋认为，有以下几种可能的解释：（1）细胞由于不正确的存储而死亡（液氮容器存在问题，细胞冷冻保存液出现问题等）。
（2）培养基缺乏添加剂。
例如，您是否添加了两倍的胎牛血清？
电池是否需要不常用的特殊添加剂？
（3）细胞密度过低，无法进行复苏。
为避免这种情况，请使用一个小的烧瓶/培养皿。
如果您可以提供要复苏的细胞类型的详细信息，这将很有用。
我的答案是关于一般哺乳动物细胞的培养，但是如果您正在研究细菌，昆虫细胞等，还有其他解释。
除上述几点外，还可以将细胞直接在液氮中快速冷冻（这是极不可能的，但有可能）。
理想情况下，在-80°C的含有异丙醇的冰箱中冷冻过夜，然后转移至液氮中。
或解冻很慢。
与普遍的看法相反，应在室温下将细胞解冻1分钟，并在水浴中孵育直至冷冻培养基呈液体。
不要在冰上融化。
另外，在冷冻保存时，重要的是细胞必须非常活跃并处于指数生长期，而不是处于平稳期。
有可能不使用博多的无血清细胞冷冻保存液！
这是一种不含血清的即用型细胞冷冻保存液。最重要的功能是该程序不需要冷却和稀释箱。无需降低温度，直接使用。
干细胞，肿瘤细胞和常规细胞可以在-80°C下长时间保存。
冷冻细胞时，请使用博多细胞冷冻保存法将细胞悬浮于对数生长期而不进行预冷，直接冷冻保存在-80°C或使用液氮悬浮细胞。快速冻结；在复苏期间在培养箱或水浴中复苏细胞
它不仅易于操作，而且提供了稳定的冷冻保存效果并提高了细胞活力。